产品介绍
蛋白质翻译后修饰(Post-translationalmodification, PTM)指的是通过在一个或多个氨基酸残基上加上修饰基团,可以改变蛋白质的物理、化学性质,进而影响蛋白质的空间构象和活性状态、亚细胞定位、折叠及稳定性以及蛋白质之间的相互作用。
随着对一 些疾病逝行深入的研究后发现很多生理病理疾病的发生真实不仅仅跟蛋白本身的表达量相关,有些情况下蛋白的表达并没有明显 的变化但是由于一些复杂的翻译后修饰的改变从而影响了整个分子机制的改变。
因此对样本进行蛋白翻译后修饰的研究就显得 尤为重要。蛋白修饰内容主要包括磷酸化、乙酰化、泛素化、糖基化、甲基化等。
实验流程
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蛋白质磷酸化(phosphorylation)指由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基团转移到底物蛋白质氨基酸残基(丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸)上的过程,是生物体内一种普通的调节方式,在细胞信号转导的过程中起重要作用。
磷酸化是蛋白质较为重要的翻译后修饰之一,它可以通过改变蛋白质的活性、亚细胞定位、互作关系和稳定性来影响蛋白质的功能,此外,磷酸化的调节还被认为参与了癌症以及其他疾病的相关的信号通路,因此,对蛋白质磷酸化修饰(包括其修饰位点)的研究一直是一个热点和难点。
详情链接:https://www.lumingbio.com/xsdbzzx/modified_phosphorization.html
蛋白质乙酰化(Acetylation)是在乙酰基转移酶(HATs/KATs)的催化下,把乙酰基团添加到蛋白质赖氨酸残基上的过程。蛋白质去乙酰化是在去乙酰化酶(HDACs/KDACs)作用下的可逆性修饰过程。
蛋白质乙酰化修饰由乙酰基转移酶和去乙酰化酶共同调节,在细胞控制基因表达、损伤修复、信号转导、蛋白质合成折叠和代谢调节等过程发挥重要的作用。在植物的免疫应答,抗逆抗胁迫,生长发育,代谢和衰老过程,肿瘤发生发展,神经退行性疾病等方面都有广泛应用。
详情链接:https://www.lumingbio.com/xsdbzzx/modified_acetyl.html
蛋白质泛素化 (Ubiquitination) 是指一个或多个泛素分子(Ubiquitin,由76个氨基酸组成的多肽)在一系列特殊的酶作用下,将细胞内的蛋白质分类,从中选出靶蛋白分子,并对靶蛋白进行特异性修饰的过程。
泛素化在蛋白质的定位、代谢、功能、调节和降解中都起着十分重要的作用,同时也参与了细胞周期、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控。因此,作为近年来生物化学研究的一个重大成果,它已然成为研究、开发新药物的新靶点。
详情链接:https://www.lumingbio.com/xsdbzzx/modified_FSH.html
糖基化(Glycosylation)是在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,与蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键的过程。糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,对于蛋白质的正确折叠、功能定位、胞内运输等起着重要作用。
其中N-糖基化是糖基化修饰中研究最广泛、最深入的一种修饰类型,指的是糖链通过与蛋白质的天冬酰胺的自由NH2基连接,在细胞识别、细胞分化、信号转导,免疫应答等在内的各种重要的生命活动发挥重要作用,在胚胎发育、癌症发生发展和免疫防御和抵御病原菌入侵等方面研究意义重大。
详情链接:https://www.lumingbio.com/xsdbzzx/tangjihua.html
服务优势
仪器平台升级 4D TIMS TOF技术,提高定量的准确性、鉴定深度,鉴定数量
分析更准确 修饰分析准确到位点、 能更清楚的判断修饰位点及表达变化
质量有保证 使用值得信赖的CST原厂抗体等进行肤段富集、 保证实验结果
通量提升 采用label free技术,克服样本通量限
应用方向
医学和动物
疾病机制研究、疾病标志物发现、疾病分子分型、
治疗靶点筛选、药物毒理机制、细胞调控、免疫防御等
植物和农业
抗逆抗病机制、胁迫机制、生长发育机制,品质性状、
育种保护研究、储藏加工条件优化等
案例文献
通过乙酰化修饰组分析鉴定玉米中真菌诱导的蛋白质超乙酰化现象
材料:玉米组织 | 主要技术:ITRAQ、乙酰化蛋白组 |
期刊:PNAS | 影响因子:9.504 |
文章摘要
赖氨酸乙酰化作为一种关键的翻译后修饰参与调节一系列生物学过程。组蛋白乙酰化在植物防御中发挥了重要作用,已知编码乙酰转移酶的病原效应蛋白可以直接乙酰化宿主蛋白从而改变宿主免疫力。然而,目前还未知内源性植物酶在免疫应答过程中是否可以调节蛋白乙酰化。本篇文章中研究团队调查效应分子HC-毒素(HCT),真菌病原菌Cochliobolus carbonum家族的组蛋白脱乙酰酶抑制剂如何通过改变蛋白质乙酰化促进玉米感染效应。通过蛋白质谱方法法团队量化了3,636种蛋白质的丰度与HCT处理的玉米植物中2,791个位点的乙酰化水平。这些数据的分析表明,乙酰化是一种广泛的翻译后修饰且影响众多的玉米基因编码的蛋白质。此外, HCT的应用能够证明植物编码的酶(组蛋白脱乙酰酶)的活性可以被调节以改变免疫应答过程中非组蛋白的乙酰化。因此,数据结果为进一步的通过可逆乙酰化对蛋白质功能的调节,并探究由炭疽杆菌触发的复杂免疫反应提供了研究基础。
方法流程
技术推荐
本文是修饰蛋白质组学研究的一个典型案例。不同于常规修饰蛋白质组学的研究文章着重于对位点/肽段水平的修饰进行鉴定,本篇文章在常规肽段富集技术的基础上引入了iTRAQ标记定量蛋白组技术,从而在肽段水平实现了修饰定量,为在不同处理条件下乙酰修饰组的定量比较奠定了研究基础。
文献来源
Justin W. Walley. et al., Fungal-induced protein hyperacetylation in maize identified by acetylome profiling. 2017. PNAS.